双报告基因用于实验系统中作相关的或成比例的检测,通常一个报告基因作为内对照,使另一个报告基因的检测均一化。检测基因表达时双报告基因通常用来瞬时转染培养细胞,带有实验报告基因的载体共转染带有不同的报告基因作为对照的第二个载体。通常实验报告基因偶联到调控的启动子, 研究调控基因的结构和生理基础。报告基因表达活力的相对改变与偶联调控启动子转录活力的改变相关,偶联到组成型启动子的第二个报告基因,提供转录活力的内对照, 使测试不被实验条件变化所干扰。通过这种方法,可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性,如,培养细胞的数目和活力的差别,细胞转染和裂解的效率。
理想的双报告基因方法应该使用户能够以荧火虫荧光素酶所具有的速度,灵敏和线性范围对同一样品中的两个报告基因同时测定。金开瑞应用Promega 公司的双荧光素酶报告基因检测(DLR)系统,提供DLR检测服务。
基因模板,需提供详细的转录因子、目的基因或microRNA信息;
实验细胞,如无特殊要求,金开瑞默认为使用293T细胞,则无需提供。
实验流程及完整报告一份,包括实验原始数据、图片、分析结果等。
服务项目 | 细分 | 注释 | 服务周期(工作日) |
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双荧光素酶报告基因 | 序列分析 | 根据客户提供信息进行启动子序列或microRNA分析 | 20 |
合成或扩增目的片段 | -- | ||
亚克隆至目标载体 | pGL3-basic | ||
质粒大提 | -- | ||
细胞培养 | -- | ||
共转染细胞 | 默认为293T细胞 | ||
荧光素酶反应发光检测 | -- |
人源多个启动子和转录因子双荧光素酶检测
大鼠microRNA与靶标基因双荧光素酶检测
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