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GST pull-down蛋白质相互作用

服务简介

蛋白-蛋白相互作用是蛋白质结构与功能研究中最重要的方面之一。GST pull-down将靶蛋白与GST融合表达,并将蛋白固化在谷胱甘肽(GSH)亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白。

诱饵蛋白"和"捕获蛋白"均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。此方法简单易行,操作方便。

金开瑞现提供的GST pull down检测技术服务,使用特异性二抗进行检测,能有效避免抗体重链对结果的信号干扰,显著提升检测效果。

服务流程

验证两种蛋白质间相互作用——

接受订单及样品
 
诱饵蛋白与猎物蛋白原核表达载体的构建
 
诱饵蛋白与猎物蛋白的诱导表达
 
诱饵蛋白与猎物蛋白的纯化
 
Pull-down技术蛋白互作分析
 
WB进一步鉴定互作蛋白表达

验证目的蛋白与细胞裂解物蛋白互作——

接受订单及样品
 
诱饵蛋白原核表达载体的构建
 
诱饵蛋白的诱导表达
 
诱饵蛋白的纯化与固定
 
Pull-down技术蛋白互作分析
 
互作靶蛋白的鉴定
客户提供

构建表达纯化靶蛋白与相关诱饵蛋白(也可选择由金开瑞构建),或者含有诱饵蛋白的细胞裂解上清或者其它;检测用一抗(也可选择由金开瑞提供)。

样品需-20℃冻存,冰袋运输。

最终交付

提供完整的实验报告, SDS-PAGE 以及western blot结果。

服务内容及说明
服务项目 服务内容 服务周期(工作日)
GST pull down In vitro GST pull down (原核表达靶蛋白与诱饵蛋白) 5周
In vitro GST pull down (原核表达靶蛋白和细胞裂解上清) 4-5周
In vitro GST pull down (真核表达靶蛋白和细胞裂解上清) 8-12周
WB检测 1周
如何订购

1. 邮件订购:请点击此处下载“GST pull down项目信息咨询单”,详细填写信息后,发送至邮箱zonghe@genecreate.com

2. 在线咨询:点击屏幕右侧“在线咨询”,或拨打咨询电话027-62431110,我们会尽快安排工作人员与您联系!

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